Metode Most Probable Number (MPN)

MPN diartikan sebagai jumlah perkiraan terdekat. Pemeriksaan MPN bertujuan untuk mengetahui adanya bakteri Coliform dan E.coli yang biasanya ditandai dengan terbentuknya gas pada media Lactose Broth (LB) dan pada media Briliant Green Lactose Bile Broth (BGLBB), pemeriksaan ini dapat dilakukan dengan cara sampel ditanam pada media Lactose Broth (LB). Hasil positif gas dipindahkan kedua seri media Briliant Green Lactose Bile Broth (BGLBB), 1 seri ditanam pada suhu 37C (untuk MPN Coliform) dan 1 seri ditanam pada suhu 44C (untuk MPN E.coli). Kemudian diinkubasi selama 24–48 jam, dan dicatat jumlah tabung positif gas. Angka yang diperoleh adalah indeks MPN Coliform untuk suhu 37C dan indeks MPN E.coli untuk suhu 44C (Fardiaz, 1992a:60).

Dalam metode MPN, pengenceran harus dilaksanakan sedemikian rupa sehingga tabung yang berisi medium cair yang diinokulasi dengan larutan hasil pengenceran tersebut mengandung lebih dari satu sel, sedangkan tabung lainnya tidak mengandung sel. Dengan demikian, setelah inkubasi diharapkan terjadi pertumbuhan pada beberapa tabung yang dinyatakan sebagai tabung positif, sedangkan tabung lainnya negatif. Untuk mendapatkan beberapa tabung negatif, pengenceran yang dilakukan dalam metode MPN harus lebih tinggi dibandingkan dengan pengenceran pada metode cawan (Fardiaz, 1993:71).

Nilai MPN adalah perkiraan jumlah unit tumbuh (growth unit) atau unit pembentuk koloni (colony forming unit) dalam sampel. Namun, pada umumnya, nilai MPN juga diartikan sebagai perkiraan jumlah individu bakteri. Satuan yang digunakan, umumnya per 100 ml atau per gram. Misalnya terdapat nilai MPN 10 dalam sebuah sampel, artinya dalam sampel tersebut diperkirakan setidaknya mengandung 10 Coliform pada setiap gramnya. Makin kecil nilai MPN, makin tinggi kualitasnya, dan makin layak dikonsumsi. Metode MPN memiliki limit kepercayaan 95 persen sehingga pada setiap nilai MPN, terdapat jangkauan nilai MPN terendah dan nilai MPN tertinggi (Krisna,2005:1).